科研试剂Sybr Green I （10000X in DMSO）的作用机制

标题：Sybr Green I （10000X in DMSO）

一、化学试剂的基本信息

保存条件：避光、-20°C储存，避免反复冻融

英文名称： Sybr Green I

中文名称： SYBR Green 1 荧光染料

激发波长：498(nm）

发射波长：522(nm）

规格标准：该试剂的纯度通常达到95%以上，规格包括1g、5g、10g等，也可按需包装。

生产商信息：陕西新研博美生物科技有限公司

二、基本定义

Sybr Green I 是一种高灵敏度的不对称菁类荧光染料，专为双链DNA（dsDNA）检测设计。

功能定位

主要结合dsDNA双螺旋的小沟区域，结合后荧光信号增强800~1000倍。

应用场景包括：

实时荧光定量PCR（qPCR）的扩增产物检测。

琼脂糖/聚丙烯酰胺凝胶中核酸的荧光染色。

基因表达分析、等温扩增、基因芯片等。

三、作用机制

（一）荧光信号产生的原理

游离状态：Sybr Green I呈微弱荧光，几乎不可检测。

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结合dsDNA后：

嵌入DNA双链小沟，分子构象改变，荧光强度激增800~1000倍。

激发波长498 nm，发射波长522 nm（绿色荧光）。

特异性：

对dsDNA亲和力最高，也可结合双链RNA（dsRNA），但与单链核酸（ssDNA/ssRNA）结合弱。

（二）在qPCR中的动态作用

Sybr Green I在qPCR循环中经历四阶段动态变化：

变性阶段（Denaturation）：

高温（95℃）使DNA双链解离，染料释放，荧光信号急剧下降。

退火/延伸阶段（Annealing/Extension）：

温度降低，引物与模板结合，DNA聚合酶合成新链。

新生成的dsDNA与Sybr Green I结合，荧光信号随产物积累逐步增强。

信号检测：

每个循环结束时的荧光强度与体系中dsDNA总量成正比，实现实时定量。

图示说明：

变性（荧光弱）→ 退火/延伸（荧光增强）→ 检测信号

（三）非特异性结合的局限性

无法区分靶DNA与非特异产物，需通过 熔解曲线分析验证产物特异性。

高浓度染料可能抑制PCR反应，需优化浓度。

四、新研博美目录列表：

FITC-GW3965

ATTO 550-羧酸甲酯

5(6)-羧基萘基荧光素

Fluorescein dilaurate

Dabcyl C2 maleimide

C6-NBD-CERAMIDE

FITC-DSPE，磷脂-荧光素

Folate-FTIC，荧光素标记叶酸

MTSEA-Fluorescein，MTSEA-荧光素

Casein，FITC-conjugated；酪朊酸，FITC标记

5-FITC-PEG5-NHS ester，Fluorescein-PEG5-NHS

FITC-Phenylboronic Acid，荧光素异硫氰酸酯苯硼酸

FITC LEL；Fluorescein Tomato lectin；荧光素标记的番茄凝集素

温馨提示：

试剂仅用于科研实验，不可用于人体~~~~~编辑作者：陕西新研博美生物科技有限公司木南